Sida loo hagaajiyo dareenka falcelinta RT-PCR ee ogaanshaha RNA

Inta lagu jiro habka loo samaynayo daraasaadka hidda-socodka, waxaan inta badan la kulannaa muunado RNA ah oo aan ku filnayn, tusaale ahaan, barashada burooyinka afka ee yaryar ee anatomical, xitaa hal unug, iyo muunado isbeddellada hidde-sidaha gaarka ah kuwaas oo lagu qoro heerarka aad u hooseeya ee unugyada aadanaha.Dabcan, baaritaanka COVID-19, haddii suufku aysan ku jirin meesha saxda ah ama aysan ku filneyn inta lagu jiro muunad, cabbirka muunada aad ayuu u hooseeyaa, waana sababta guddiga caafimaadka iyo qorsheynta qoyska ay u soo baxeen laba maalmood ka hor iyo ku baasay tijaabada, haddii sambalaha aashitada nukliyeerka aanu qaadin lix muunado, waad soo sheegi kartaa.

Dareenka reagent waa muhiim sababtoo ah waxaan haysanaa dhibaatadan ama dhibaatadaas, markaa maxaan samayn karnaa si aan u wanaajino dareenka RT-PCR?

Inta aynaan ka hadlin xalalka suurtagalka ah, aan xusno laba dhibaato oo waaweyn oo ku saabsan xaaladda aan soo sheegnay.

Ugu horreyntii, waxaan ka walaacsanahay luminta RNA marka aan ku haysanno muunadayada dhowr unug oo keliya.Haddii hababka kala-soocidda iyo nadiifinta dhaqameed la isticmaalo, sida habka tiirka ama habka roobka ee aashitada nucleic, waxaa jirta suurtogalnimo sare oo ah in dhowrka muunado ay lumin doonaan.Hal xal ayaa ah in lagu daro molecule side, sida tRNA, laakiin xitaa markaa, ma jirto dammaanad qaadka in tijaabada soo kabashadayadu ay OK tahay.

Haddaba maxaa ka wanaagsan?Ikhtiyaar wanaagsan oo loogu talagalay unugyada dhaqanka ama shaybaarrada microanatomical waa in la isticmaalo lysis toos ah.

Fikradda ayaa ah in la kala qaybiyo unugyada 5 daqiiqo, lagu sii daayo RNA xalka, ka dibna la joojiyo falcelinta 2 daqiiqo, ka dibna ku dar lysate si toos ah falcelinta qoraallada si aysan RNA u lumin, ugu dambeyntiina si toos ah u dhig natiijada cDNA galay falcelinta-waqtiga dhabta ah.

Laakiin maxaa dhacaya haddii, sababtoo ah barta bilawga xaddidan ama qadar yar oo ah muujinta hidde-sidaha, waxaan dib u warshadeyn karnaa dhammaan RNA oo aan wali bixinin qaabab ku filan si aan u helno calaamad wanaagsan oo wakhtiga dhabta ah?

Xaaladdan oo kale, tallaabada hore-u-qaadista waxay noqon kartaa mid aad waxtar u leh.

Kuwa soo socdaa waa qorshe lagu kordhinayo dareenka ka dib qoritaanka gadaasha.Kahor intaanan bilaabin, waxaan u baahanahay inaan waydiino bartilmaameedyada aan xiisayno, si aan u qaabaynno qormooyin gaar ah yoolalkan si loo sii kordhiyo.

Tan waxaa lagu gaari karaa iyadoo la abuurayo qalab isku dhafan oo leh ilaa 100 lammaane oo asal ah iyo wareeg falcelin ah 10 ilaa 14 jeer.Sidaa darteed, Isku-dhafka 'Master Mix' si gaar ah loogu talagalay shuruudahan ayaa loo baahan yahay si horay loogu kordhiyo cDNA-da la helay.

Sababta loo dejiyo tirada wareegyada inta u dhaxaysa 10 iyo 14 waa in tiradan xaddidan ee wareegyada ay xaqiijiso kala soocida u dhexeeya bartilmaameedyada kala duwan, taas oo muhiim u ah cilmi-baarayaasha u baahan macluumaadka unugyada unugyada.

Ka dib markii hore loo kordhiyo, waxaan heli karnaa xaddi badan oo cDNA ah, si dareenka ogaanshaha ee dhabarka dambe uu si weyn u wanaajiyo, waxaanan xitaa wanaajin karnaa muunada oo waxaan sameyn karnaa falcelin PCR ah oo badan si loo baabi'iyo khaladaadka suurtagalka ah.